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氯丙嗪酶联免疫检测老虎机娱乐平台

本老虎机娱乐平台是利用竞争ELISA方法在微孔板上预包被氯丙嗪抗原样本中的氯丙嗪和微孔条上预包被的抗原竞争抗氯丙嗪抗体,同时抗氯丙嗪抗体与酶标二抗(酶标物)相结合,经TMB底物显色,样本吸光度值与其所含氯丙嗪量呈负相关,与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数,即可得出样本中氯丙嗪的含量。


    氯丙嗪酶联免疫检测老虎机娱乐平台

使用说明书


检测原理

本老虎机娱乐平台是利用竞争ELISA方法在微孔板上预包被氯丙嗪抗原样本中的氯丙嗪和微孔条上预包被的抗原竞争抗氯丙嗪抗体,同时抗氯丙嗪抗体与酶标二抗(酶标物)相结合,经TMB底物显色,样本吸光度值与其所含氯丙嗪量呈负相关,与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数,即可得出样本中氯丙嗪的含量。

二、检测范围

本老虎机娱乐平台应用ELISA技术研发的药物残留检测产品,可定性、定量检测肌肉组织、水产类等样本中的氯丙嗪含量

三、交叉反应率

与类似物的交叉反应率:

氯丙嗪………………………………………100

四、老虎机娱乐平台组成

酶标板1块,96/

标准液6瓶(1.0 mL/瓶)

0 ppb0. 1 ppb0.3 ppb0.9 ppb2.7 ppb8.1 ppb

酶标记物 ……………………..………………12 mL

抗体工作液  …………………..………………7 mL

底物液A………………………..………………7mL

底物液B………………………..………………7mL

终止液………………………..………………7mL

2浓缩洗涤液 ………………..………………30mL

2×浓缩复溶液 …………………………………50mL

说明书………………………..………………1

五、使用单位需自备的设备及试剂

1仪器

微孔板酶标仪(450 nm)

氮气吹干装置;振荡器离心机;涡旋仪;

电子天平(感量0.01 g)。

2器材

容量瓶:100 mL500 mL1000 mL

单道微量移液器:20 μL200 μL100 μL~1000 μL

多道微量移液器:30 μL300 μL

3)试剂

浓盐酸、正己烷、氢氧化钠、丙酮、去离子水

六、溶液的配制

样本前处理需配制

配液12M氢氧化钠溶液

       称取8g氢氧化钠加入去离子水定容至100mL即可。

配液20.2M盐酸

       量取8.3 mL浓盐酸加入到500 mL去离子水中即

       

配液3复溶工作液

2×浓缩复溶液在使用前请按11稀释(1份浓缩复溶液+1份去离子水)

配液4洗涤工作液

20×浓缩洗涤液在使用前请按1:19稀释(1份浓缩洗涤+19份去离子水)(可按需配置)

七、样本前处理方法

样本处理前须知

   处理任何样本时,都须注意:

1)实验中必须使用一次性吸头,在吸取不同的试剂时要更换吸头。

    2)实验之前须检查各种实验器具是否干净,必须使用洁净实验器具,以避免污染干扰实验结果。

样本处理步骤

A组织方法一(鸡肉、猪肉等)

1 准确称取1.0±0.05 g 均质过的组织样本于50 mL离心管中;

2加入3.2 mL丙酮再加入0.8 mL 0.2M盐酸溶液并充分振荡混匀2 min室温4000 r/min,离心10 min

3、 取2 mL上层液体至另一个50 mL离心管中,加入

    4 mL 2M氢氧化钠溶液,室温静置10 min

4、 再加入6.4 mL正已烷,涡动3min室温4000 r/min,离心5 min

54mL上层液体至另一个10 mL离心管中50 ~60 水浴氮气吹干

6加入1 mL复溶工作液,充分振荡混合2 min溶解残留物;

750 μL样本进行检测

B组织方法二(鱼、虾等水产)

1 准确称取1.0±0.05 g 均质过的组织样本于50 mL离心管中;

2、 加入1 mL 0.2M盐酸溶液并充分振荡混匀2 min加入3 mL丙酮充分振荡涡动3 min室温4000 r/min,离心10 min

3、 取2 mL上层液体至另一个50 mL离心管中,加入4 mL 2M氢氧化钠溶液;

4、 再加入6.5 mL正已烷,涡动3min室温4000 r/min,离心5 min

54mL上层液体至另一个10 mL离心管中50 ~60 水浴氮气吹干

6加入1 mL复溶工作液,充分振荡混合2 min溶解残留物;

750 μL样本进行检测

八、酶联免疫检测步骤

测定前须知:

1 使用之前将所有试剂和需用微孔板回升至室温。

2 使用之后立即将所有试剂放回2~8 

3 在使用中不要让微孔干燥。 

4 ELISA分析中的重复性,很大程度上取决于洗板的一致性,正确的洗板操作是ELISA测定程序中的要点。

5 在所有恒温孵育过程中,避免光线照射,用板膜盖住微孔板。

测定步骤:

        1将所需试剂和微孔板从冷藏环境中取出,在室温

            下平衡30 min,每种液体使用前均须摇匀。注意

            标准液均需做2个平行试验。

2、 加标准品/样品:加标准品/样品50 μL/孔到对应的微孔中,然后加入氯丙嗪抗体工作液50 μL/孔,轻轻振荡混匀盖板膜盖好,室温25 避光反应30 min

3 洗板:小心揭开盖板膜,将孔内液体甩干,加洗涤液 250 μL/孔,每次浸泡15~30 s,充分洗涤4~5次,用吸水纸拍干。

4 加酶标加入氯丙嗪标记物100 mL/轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板后置25避光环境中反应30 min取出重复洗板步骤3

5、 显色:加入底物液A50 mL/孔,再加底物液B50 mL/孔,轻轻振荡混匀,盖板膜盖好,室温25 避光反应15 min

6测定:每孔加100 μL终止液,设定酶标仪450 nm测定OD值(建议用450/630 nm双波长检测,在5 min内读完数据)。

九、结果分析

所测得的标准液或样品吸光度的平均值(B)除以第一个标准液(0标准液)的吸光度(B0)值再乘以100%,得到百分吸光度值。

百分吸光度值(%)=

以标准品浓度的10为底的对数为X百分吸光值为Y轴,绘制标准曲线。将样本的百分吸光值代入标准曲线,从标准曲线上读出样本所对应的值,作为10的幂,乘以稀释倍数,即为样品中所含氯丙嗪的量。

    利用老虎机娱乐平台专业分析软件进行计算,更便于大量样品的准确、快速分析。

十、样本稀释倍数

组织方法一(鸡肉、猪肉等)4

组织方法二(鱼、虾等)4

、老虎机娱乐平台灵敏度、准确度、精密度

老虎机娱乐平台灵敏度0.1 ppb

样本最低检测限:

组织方法一(鸡肉、猪肉等)……………0.5ppb

组织方法二(鱼、虾等)…………………0.5 ppb

回收率:

组织方法一(鸡肉、猪肉等)………………91±15%

组织方法二(鱼、虾等)…………………72±20%

精密度

         老虎机娱乐平台的变异系数均小于10%

、注意事项

      1室温低于20 或试剂及样本没有回到室温20~25

        会导致所有标准的OD值偏低。

2、在洗板过程中如果出现板孔干燥的情况,则会出现标准曲线不成线性,重复性不好的现象所以洗板拍干后应立即进行下一步操作。

3、反应终止液为2M硫酸,避免接触皮肤;若不慎滴漏到皮肤上,请尽快用水冲洗。

4、不要使用过了有效日期的老虎机娱乐平台;也不要使用过了有效期的老虎机娱乐平台中的任何试剂,掺杂使用过了有效期的老虎机娱乐平台会引起灵敏度的降低;不要交换使用不同批号老虎机娱乐平台中的试剂。

5、保存老虎机娱乐平台于2~8 ,不要冷冻,将不用的微孔板放进自封袋重新密封标准物质和无色的发色剂对光敏感,因此要避免直接暴露在光线下。

6、显色试剂有任何颜色表明发色剂变质,应当弃

0标准的吸光度(450 nm)值小于0.5A450nm<0.5)时,表示试剂可能变质。

7在加入底物液后,一般显色15 min即可。若颜色较浅,可延长反应时间到20 min(或更长),但不得超过30 min反之,则减短反应时间。

8该老虎机娱乐平台最佳反应温度为25 ,温度过高或过低将导致检测吸光度值和灵敏度发生变化。

、贮藏条件及保存期

贮藏条件:在2~8 保存老虎机娱乐平台

保存期:本老虎机娱乐平台有效期为12个月。



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